Establecimiento de una metodología de micropropagación mediante la embriogénesis somática en el cultivo del boniato (Ipomoea batatas (L.) Lam.)

Abstract

El boniato (Ipomoea batatas (L.) Lam.), se ha convertido en un alimento habitual sobre todo en la zona oriental de Cuba. Sin embargo, existen algunas limitantes para su introducción y extensión en las áreas agrícolas, una de lascuales es la poca disponibilidad de material de plantación; por lo cual, se desarrolló el presente trabajo con el objetivo de establecer una metodología que permita la obtención de abundante material a través de la micropropagación mediante la embriogénesis somática como una vía rápida para el establecimiento de bancos de “semilla” de calidad en caso necesario. Para ello se partió de explantes de limbos foliares, peciolos y entrenudos de brotes jóvenes de los clones CEMSA 78-354, INIVIT B 90-1, INIVIT B 93-1, Yabú-8 y Jewel. El mejor porcentaje de desinfección se logró con el empleo del hipoclorito de sodio al 1% con un tiempo fijo de inmersión de 15 minutos. El limbo foliar procedente de brotes de raíces tuberosas resultó el mejor explante para la formación de callos, determinándose además la procedencia, edad, zona del limbo foliar y la posición sobre el medio de cultivo más adecuada para este fin. La mayor efectividad para la formación de callos potencialmente embriogénicos, se obtuvo en el medio de cultivo propuesto por Murashige y Skoog (1962) con 2,4-D (0,50 mg.L-1) y 6-BAP (0,25 mg.L-1); la formación de los embriones somáticos se logró en este mismo medio con 2,4-D (0,2 mg.L-1), para la maduración de los mismos fue necesaria la adición de ABA (1,0 mg.L-1) al medio basal y el TDZ (0,25 mg.L-1) posibilitó los mejores resultados para la germinación. La conversión en plántulas se obtuvo con el empleo del GA3 (10,0 mg.L-1). Se logró la aclimatización de las vitroplantas con una supervivencia de un 83 a 100% y la plantación en condiciones de campo resultó exitosa; además, se realizaron estudios histológicos durante todo el proceso, así como análisis bioquímicos y moleculares para evaluar la estabilidad genética de las plantas obtenidas. The sweet potato (Ipomoea batatas (L.) Lam.), Has become a common food especially in the eastern part of Cuba. However, there are some limitations for its introduction and extension in agricultural areas, one of which is the scarce availability of planting material; Therefore, the present work was developed with the objective of establishing a methodology that allows obtaining abundant material through micropropagation through somatic embryogenesis as a fast track for the establishment of banks of quality "seed" if necessary . To this end, leaf explants, petioles and internodes of young shoots of clones CEMSA 78-354, INIVIT B 90-1, INIVIT B 93-1, Yabu-8 and Jewel were started. The best percentage of disinfection was achieved with the use of 1% sodium hypochlorite with a fixed immersion time of 15 minutes. The foliar limb from shoots of tuberous roots was the best explant for callus formation, determining also the origin, age, area of the leaf limb and position on the most appropriate culture medium for this purpose. The greatest effectiveness for the formation of potentially embryogenic calluses was obtained in the culture medium proposed by Murashige and Skoog (1962) with 2,4-D (0.50 mg.L-1) and 6-BAP (0.25). mg.L-1); the formation of somatic embryos was achieved in this same medium with 2,4-D (0.2 mg.L-1), for the maturation of the same was necessary the addition of ABA (1.0 mg.L-1 ) to the basal medium and the TDZ (0.25 mg.L-1) allowed the best results for germination. The conversion in seedlings was obtained with the use of GA3 (10.0 mg.L-1). The acclimatization of vitroplants with a survival of 83 to 100% was achieved and the plantation under field conditions was successful; In addition, histological studies were conducted throughout the process, as well as biochemical and molecular analyzes to assess the genetic stability of the plants obtained.(traducción automática)