Determinación de estabilidad genética en vitroplantas de clavel Español (Dianthus caryophyllus L.), micropropagadas con Biobras-16

Abstract

El clavel español (Dianthus caryophyllus L.) se encuentra entre las especies de flores y plantas ornamentales más solicitadas por la población cubana. Su propagación in vitro con el empleo del análogo de brasinoesteroide Biobras-16, producido en Cuba, permite obtener un elevado coeficiente de multiplicación. Sin embargo, algunas de las técnicas del cultivo in vitro y algunos de los biorreguladores empleados en estas, pueden introducir alteraciones en el material hereditario, por lo que resulta importante determinar si se mantuvo estable genéticamente. En el presente trabajo nos propusimos el objetivo de estudiar la estabilidad genética a través del empleo de marcadores bioquímicos, en vitroplantas de clavel español micropropagadas con diferentes concentraciones de Biobras-16 como sustituto de la citoquinina. El material vegetal fue obtenido a partir del cultivo de meristemos en medios con Biobras-16 como sustituto de la Kinetina, a las concentraciones de 0,1; 0,01 y 0,001 mg.L-1. Las plantas crecidas en cada uno de estos tratamientos a los tres meses fueron multiplicadas por esquejes durante dos subcultivos, sin el empleo de este análogo de brasinoesteroide. Para la preparación de las muestras del estudio isoenzimático, fueron tomadas hojas de plantas de los diferentes tratamientos del cultivo de meristemos y las propagaciones por esquejes, y fueron analizados los sistemas isoenzimáticos Peroxidasas, Fosfatasas Ácidas, Malato Deshidrogenasas y Esterasas. Las electroforesis se realizaron en geles de poliacrilamida (PAGE) en lámina vertical. Como resultado, aunque el sistema isoenzimático Fosfatasas Ácidas resultó polimórfico, de manera general se determinó que se mantuvo la estabilidad genética de las plántulas regeneradas. The Spanish carnation (Dianthus caryophyllus L.) is one of the flowers and ornamental plants most requested by the Cuban population. The in vitro propagation of this species with the employment of the analogous of brassinoesteroid Biobras-16, produced in Cuba, allows to obtain a high coefficient of multiplication. However, some of the in vitro culture techniques and some of the bioregulators employed, can introduce alterations in the genetic material, so it turns out necessary to supervise if it kept genetically stable. For these reasons, in the present work we proposed the aim to study the genetic stability with the employment of biochemical markers, of plants of carnation micropropagated with different concentrations of Biobras-16 in substitution of cytoquinin. The vegetal material was obtained from the meristems culture of spanish carnation vitroplants, in medium with Biobras-16 as a substitute of cytoquinin, at the concentrations of 0,1; 0,01 y 0,001 mg.L-1. The plants grown in each of these treatments, three months later were multiplied by cuts during two subcultures, without Biobras-16. For the sample preparation of the isoenzymatic study, it was taken leaves of plants of the different treatments of the meristems culture and the cutting propagations and it was studied the systems Peroxidases, Acid Phosphatases, Malate Dehydrogenases and Esterases. The electrophoresis were made on vertical slab polyacrylamide gels (PAGE). As result, although the Acid Phosphatases isoenzymatic system turned out to be polymorphic, in a general way it is considered that it was kept the genetic stability of the regenerated plants. (sic)