Micropropagación de clavel español (Dianthus caryophyllus L.) con el empleo de Biobrás-16

Abstract

Los claveles constituyen una de las flores más cotizadas a nivel internacional debido a su belleza, su duración después de cortados y su posibilidad de florecer todo el año. De aquí que el presente trabajo se realizó con el objetivo de determinar la efectividad del Biobrás-16, biorregulador de producción nacional con propiedades estimuladoras del crecimiento vegetal, como posible sustituto de la Kinetina en la propagación in vitro del clavel español (Dianthus caryophyllus L.). Se indujo la germinación de las semillas de este cultivo para evaluar el efecto de diferentes tratamientos desinfectantes; a partir de las plantas obtenidas se extrajeron los meristemos que fueron sembrados en varios medios de cultivo con diferentes concentraciones del análogo de brasinoesteroide Biobrás-16, en sustitución de la citoquinina. Las plantas obtenidas fueron propagadas en medio MS a partir de esquejes, conservando los tratamientos de que provenían del cultivo de meristemos. Durante la aclimatización de las plantas se realizó el montaje de dos ensayos: uno consistió en la siembra de las plantas obtenidas en la segunda propagación, manteniendo los tratamientos del cultivo in vitro, y en el otro se realizó la aspersión foliar con soluciones de Biobrás-16 con concentraciones idénticas a las empleadas en el cultivo de meristemos. Con el objetivo de determinar la estabilidad genética en el material vegetal cultivado in vitro con el uso del análogo de brasinoesteroide, se efectuaron análisis citogenéticos e isoenzimáticos. Se observó que ambos tratamientos de desinfección utilizados resultaron efectivos, eliminándose la contaminación y sin provocar daños a las plantas. En el cultivo de meristemos de manera general se determinó que el Biobrás-16 tuvo un efecto de citoquinina en la inducción de brotes y una acción sinérgica con la auxina en la inducción de raíz. En las propagaciones por esquejes el efecto positivo de este análogo de brasinoesteroide estuvo en dependencia de la dosis utilizada. En los ensayos de aclimatización el Biobrás-16 tuvo un efecto favorable sobre la supervivencia de las plantas. Se estableció un método de conteo de cromosomas para el clavel español, comprobándose el número cromosómico 2n=2x=30, y determinándose su constancia durante la propagación, lo que indica que el Biobrás-16 en las concentraciones utilizadas y en las condiciones de cultivo no provocó variación en el número cromosómico. De manera general se considera que se mantuvo la estabilidad genética de las vitroplantas regeneradas. Carnations are one of the most sought-after flowers internationally due to their beauty, their duration after cutting and their possibility to bloom all year round. Hence, the present work was carried out with the objective of determining the effectiveness of Biobrás-16, a bioregulator of national production with plant growth stimulating properties, as a possible substitute for Kinetina in the in vitro propagation of the Spanish carnation (Dianthus caryophyllus L.). The germination of the seeds of this crop was induced to evaluate the effect of different disinfectant treatments; From the obtained plants, the meristems were extracted, which were planted in several culture media with different concentrations of the brassinosteroid analog Biobrás-16, in substitution of the cytokinin. The plants obtained were propagated in MS medium from cuttings, preserving the treatments that came from the meristem culture. During the acclimatization of the plants, two trials were carried out: one consisted in the planting of the plants obtained in the second propagation, maintaining the treatments of the culture in vitro, and in the other, the foliar spray was carried out with Biobrás- 16 with concentrations identical to those used in the cultivation of meristems. In order to determine the genetic stability in the plant material cultivated in vitro with the use of the brassinosteroid analogue, cytogenetic and isoenzymatic analyzes were carried out. It was observed that both disinfection treatments used were effective, eliminating the contamination and without causing damage to the plants. In the culture of meristems in general, it was determined that Biobrás-16 had a cytokinin effect in the induction of shoots and a synergistic action with auxin in root induction. In the propagations by cuttings, the positive effect of this brassinosteroid analogue was dependent on the dose used. In the acclimatization trials the Biobrás-16 had a favorable effect on the survival of the plants. A chromosome counting method was established for the Spanish carnation, checking the chromosome number 2n = 2x = 30, and determining its constancy during the propagation, which indicates that the Biobrás-16 in the concentrations used and in the culture conditions do not caused variation in the chromosomal number. In general, it is considered that the genetic stability of the regenerated vitroplants was maintained.