Una nueva toxina de la anémona de mar Condylactis gigantea con efecto de inactivación del canal de sodio

Abstract

Una nueva toxina de péptido exhibe un peso molecular de 5043Da (av.) y compuesto por 47 residuos del aminoácido fue aislado de la anémona de mar Condylactis gigantea. Purificación del péptido fue alcanzada por un procedimiento cromatográfico multietapa monitoreo su actividad paralizante fuerte sobre crustáceos (LD50 aprox. 1 mg/kg). Análisis de la secuencia completa del péptido tóxico reveló el aislamiento de un nuevo miembro de la anémona de mar toxinas de canal de sodio que contiene el patrón típico de los seis residuos de cisteína de tipo I. De 11 kg del material mojado de la partida, aproximadamente 1 g de la toxina peptídica fue aislado. La acción fisiológica de la nueva toxina de C. gigantea CgNa investigaron sobre corrientes de sodio de las neuronas de ganglio de raíz dorsal rata en cultivo utilizando la técnica de la abrazadera del remiendo de células completas (n 60 ¼). Bajo actual abrazadera condición (CgNa) mayor potencial de acción duración. Este efecto es debido a la ralentización de la inactivación de la corriente de la sodio TTX-S, sin modificar el proceso de activación. CgNa prolonga la duración del potencial de acción cardiaco y mayor fuerza contráctil aunque a concentraciones más altas 100-fold que la Anemonia sulcata toxina ATXII. La acción sobre la inactivación del canal de sodio y acoplamiento excitación-contracción cardiaca se asemejan a los resultados anteriores con compuestos obtenidos de ésta y otras anémonas de mar. A new peptide toxin exhibiting a molecular weight of 5043Da (av.) and comprising 47 amino acid residues was isolated from the sea anemone Condylactis gigantea. Purification of the peptide was achieved by a multistep chromatographic procedure monitoring its strong paralytic activity on crustacea (LD50 approx. 1 mg/kg). Complete sequence analysis of the toxic peptide revealed the isolation of a new member of type I sea anemone sodium channel toxins containing the typical pattern of the six cysteine residues. From 11 kg of wet starting material, approximately 1 g of the peptide toxin was isolated. The physiological action of the new toxin from C. gigantea CgNa was investigated on sodium currents of rat dorsal root ganglion neurons in culture using whole-cell patch clamp technique (n ¼ 60). Under current clamp condition (CgNa) increased action potential duration. This effect is due to slowing down of the TTX-S sodium current inactivation, without modifying the activation process. CgNa prolonged the cardiac action potential duration and enhanced contractile force albeit at 100-fold higher concentrations than the Anemonia sulcata toxin ATXII. The action on sodium channel inactivation and on cardiac excitation-contraction coupling resemble previous results with compounds obtained from this and other sea anemones.